Universität Tübingen
Experimentelle Untersuchung des pathogenen Adhäsionsvorganges der Malaria tropica mit Schwingquarzsensoren
Abstract
Die Fähigkeit, Plasmodium falciparum-infizierter Erythrozyten über Rezeptor-Ligand-Wechselwirkungen an vaskuläres Endothel zu adhärieren, ist das Schlüsselereignis der Pathogenese der Malaria tropica und der damit verbundenen klinischen Symptomatik. Plasmodium falciparum induziert die Expression von PfEMP 1 an der Oberfläche parasitierter Erythrozyten und ermöglicht dadurch die Anheftung an verschiedenste Rezeptoren der Endothelzellen. Die Zielvorgabe der vorliegenden Arbeit war die experimentelle Untersuchung dieses pathogenen Adhäsionsvorganges mittels Schwingquarzsensorik. Dazu sollte der Zytoadhäsionsvorgang später Blutstadien Plasmodium falciparum-infizierter Erythrozyten an die Rezeptoren CD36 und CSA auf die Ebene der innovativen QCM-Technologie übertragen werden. In der Arbeitsgruppe für Biosensorik des IKET Tübingen wurde die QCM-Technologie damit weltweit erstmals für die Malariaforschung eingesetzt. Die Entwicklung und Optimierung geeigneter Beschichtungssysteme für die Schwingquarzsensoren sowie eines Protokolls zur Übertragung der einzelnen Komponenten des Zytoadhäsionsvorganges auf das Analysegerät Fidget Type Fg T1 waren Hauptbestandteile der Arbeit. Ein Protokoll zur Immobilisierung der den Hauptrezeptor CD36 tragenden C32-Membranen auf Basis der Poly-L-Lysin-Beschichtung entwickelte Frau Dipl. Biol. Daniela Kömpf im Rahmen ihrer Dissertation. In der vorliegenden Arbeit wurde der Ankopplungsvorgang Plasmodium falciparum-infizierter Erythrozyten an die den Hauptrezeptor CD36 tragenden C32-Membranen im Analysegerät Fidget Type Fg T1 biosensorisch reproduzierbar erfasst und untersucht. Außerdem gelang der Nachweis der erfolgreichen Immobilisation des in der Plazenta vorkommenden Rezeptors CSA mittels Biotinylierung auf der mit NeutrAvidin beschichteten Schwingquarzoberfläche. Als weitere Möglichkeit zur Visualisierung des komplexen Zytoadhäsionsvorganges wurde der Versuchablauf abschließend auf die mikrofluidische Sensorplattform übertragen und konnte so mithilfe entsprechender Time-Lapse-Aufnahmen live mitverfolgt werden.
Author and committee
dc:creator, dc:contributor.*- Author
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- Kleiner, Stefani
Identifiers
dc:identifier.*- Identifier
- hdl:10900/45885