Regulation und Funktion von Mitgliedern der TNFĄ-Familie bei Doxorubicin-induzierter Apoptose und bei einem Patienten mit einem lymphoproliferativen Syndrom

Apoptose ist ein physiologischer Prozeß, der unter anderem für die embryonale Entwicklung, das Gleichgewicht von Zellwachstum und Zelluntergang, die Immunregulation und die Tumorregression von zentraler Bedeutung ist. Bei der Induktion von Apoptose spielen diverse Mitglieder der TNFa-Familie eine zentrale Rolle. Fünf der bisher bekannten Rezeptoren (TNF-R, TRAIL-R1, TRAIL R2, TRAMP und CD95/Apo-1) sind durch eine intrazelluläre „Todes-Domäne“ charakterisiert, welche für die Weiterleitung des Apoptose-Signals notwendig ist. Zwei weitere Rezeptoren (TRAIL-R3 und TRAIL-R4) weisen keine derartige intrazelluläre Domäne auf, so daß ihnen eine protektive Funktion zugeschrieben wird. RANK, der membrangebundene Rezeptor für RANKL, besitzt keine Todesdomäne, aktiviert jedoch NF-kB. Die bisher bekannten zytotoxischen Liganden (TNF a, CD95-L, TRAIL) binden an den jeweiligen Rezeptor und aktivieren über eine Rezeptor-Trimerisierung den intrazellulären Apoptose-Effektor-Weg. Mutationen in einigen der genannten Moleküle wurden als pathoäthiologischer Mechanismus für verschiedene lymphoproliferative Syndrome identifiziert. Die Ergebnisse der vorliegenden Arbeit zeigen, dass RANKL eine Schlüsselrolle bei der Doxorubicin-induzierten Apoptose spielt. Für die in vitro-Untersuchungen wurden CEM und PBMC mit 1 mM Doxorubicin inkubiert. Die funktionelle Analyse mittels FACS zeigte, dass 50-60% der untersuchten Zellen innerhalb von 12 Stunden Apoptose begangen hatten. Auch rRANKL, rTRAIL, aCD95 mAb und Staurosporin waren in der Lage, Apoptose zu induzieren. Auf RNA-Ebene konnten in CEM wie auch in PBMC folgende der bisher bekannten Rezeptoren und Liganden der TNFa-Familie sowie der TNFa-Rezeptorenfamilie nachgewiesen werden: TRAIL, TRAIL-R1, TRAIL-R2, TRAIL-R3, TRAMP, CD95, CD95-L und RANKL. Während sich bei den Rezeptoren sowie bei TRAIL unter Inkubation mit Doxorubicin keine Veränderung der Expression zeigte, unterlagen CD95-L und RANKL einer Hochregulation mit einem Maximum nach 4-6

Author

• Pfister, Stefan

Identifier

hdl:10900/44257

OAI record oai:identifier

https://publikationen.uni-tuebingen.de/oai/request?verb=GetRecord&metadataPrefix=mets&identifier=oai%3Apublikationen.uni-tuebingen.de%3A10900%2F44257