Caractérisation des récepteurs opiacés de la médullo-surrénale de bœuf. Rôle particulier pour le récepteur K et son ligand endogène la dynorphine

Cette étude décrit dans un premier temps la caractérisation des récepteurs opiacés de la médullo-surrénale de boeuf. Pour ce faire, nous avons utilisé des ligands prototypiques de chaque type de récepteurs opiacés (µ, ?, K et ?) en absence ou en présence de bloqueurs sélectifs pour masquer les récepteurs de réactivité croisée. Ainsi, les études d'essais de liaison aux récepteurs (compétition et saturation) ont permis de démontrer une hétérogénéité de récepteurs opiacés. En regard des types connus, nos résultats suggèrent la présence des récepteurs K1, K2, µ, ? et ?. Les récepteurs K1et K2 ayant été mieux caractérisés pour les besoins de cette étude. Leurs caractéristiques de liaison sont les suivantes: - les récepteurs K1 : KD : 0.66 nM; Bmax : 12 pmol/g prot. - les récepteurs K2 : KD : 11.1 nM; Bmax : 56 pmol/g prot. Par contre, les récepteurs µ, ? et ? ont aussi été perçus par nos études de saturation et ont donné les caractéristiques de liaison suivantes: - les récepteurs µ : KD : 1.29 nM; Bmax : 38 pmol/g prot. - les récepteurs ? : KD : 0.67 nM; Bmax : 4.7 pmol/g prot. - les récepteurs ? : KD : 4.54 nM; Bmax : 32 pmol/g prot. L'utilisation d'une préparation cellulaire fraîchement isolée de la médullo-surrénale de boeuf a permis de vérifier l'effet de différents composés opiacés appartenant aux différents types de récepteurs (µ, ?, K et ?) sur la sécrétion des catécholamines (CA) induite par l'acétylcholine (ACh). De ces expériences on remarque : 1) que les agonistes K, plus particulièrement du sous-type K1, comme la dynorphine A-(1-13) (Dyn A-(1-13)) et l'U-50,488H ainsi que l'agoniste ?, le (±) SKF-10047, sont de puissants inhibiteurs de la sécrétion des CA induite par l'ACh. 2) que les agonistes ? et µ, D-Ser2-Thr6-Leu-Enk (DSLET) et dihydromorphinone (DHMone) sont inactifs. 3) que l'inhibition obtenue par l'U-50,488H est spécifique aux sécrétions de CA induites par des agents nicotiques et non pas par le K+ et les ionophores du calcium (Ca2+). 4) que l'inhibition obtenue par l'U-50,488H est non compétitive avec les agents nicotiniques en regard de leur récepteur et n'est pas renversée en augmentant la concentration de Ca2+. 5) que l'inhibition obtenue par l'U-50,488H est antagonisée par des antagonistes ayant une bonne affinité pour les récepteurs K comme le MR-2266. 6) que la structure minimale de la Dyn A-(1-13) pour l'inhibition réside dans le fragment N-terminal, la Dyn A-(1-8), le fragment C-terminal, la Dyn A-(6-13), étant inactif. 7) que la tyrosine en position 1 n'est pas essentielle dans l'activité inhibitrice de la Dyn A-(1-13) puisque les fragments Dyn A-(2-13) et -(3-13) ainsi que l'analogue Ala1-Dyn A-(1-13) possèdent une activité inhibitrice. Finalement, l'utilisation de la glande surrénale perfusée, un système plus physiologique, a permis de confirmer le profil pharmacologique d'inhibition obtenu au niveau des cellules chromaffines isolées soit de type K (K1). L'ensemble de nos résultats démontrent une hétérogénéité de récepteurs opiacés et suggèrent que les récepteurs du sous-type K1 et les peptides appartenant à la famille de la Dyn A modulent la sécrétion des CA en réponse au stress (ou à l'ACh) au niveau de la médullo-surrénale.

Name thesis:degree_name

Ph. D.

Level thesis:degree_level

Doctorat

Discipline thesis:degree_discipline

Pharmacologie

Grantor dc:publisher

Université de Sherbrooke

Year dc:date.issued

1986

Author dc:creator

• Dumont, Michel

Advisor dc:contributor.advisor

• [non identifié]

Language dc:language.iso

fr

Handle dc:identifier.uri

http://hdl.handle.net/11143/11727

OAI identifier oai:identifier

oai:usherbrooke.scholaris.ca:11143/11727