Expression et fonction d'ACSL4 dans les glioblastomes

Les acides gras participent à de nombreux processus métaboliques tel que la production d’hormones, le stockage d’énergie à long terme ainsi que la formation des membranes cellulaires. Les Acyl-CoA synthétases ou ACS sont des enzymes qui ont pour rôle d’activer les acides gras afin que ces derniers puissent rentrer dans les différentes voies métaboliques énumérées. L’ACSL4 est l’acyl-CoA synthétase à longue chaine qui intervient dans l’activation d’acides gras possédant une longue chaine carbonée et cette enzyme a une affinité particulière pour les acides gras polyinsaturés (AGPI) dont l’acide arachidonique (AA) et l’acide docosahexaénoïque (DHA). On retrouve deux formes protéiques possibles de cette enzyme chez l’humain. L’une serait exclusivement exprimée dans le cerveau tandis que l’autre est retrouvée dans tous les tissus y compris le cerveau. De nombreuses études ont prouvé le lien entre les ACS et divers types de cancer. Étant donné que l’ACSL4 a une forme retrouvée uniquement dans le cerveau, les glioblastomes multiformes ou GBM qui représentent le type de cancer primaire cérébral le plus agressif constituent donc un sujet d’étude intéressant. Des résultats préliminaires de notre laboratoire avaient montré une différence d’expression d’ARN codant pour cette enzyme chez des tumeurs et les lignées cellulaires GBM comparativement aux tissus cérébraux non cancéreux. Cette étude permet de confirmer qu’on retrouve plusieurs transcrits de l’acsl4 dans les tissus non cancéreux, ce qui n’est pas le cas dans les tissus cancéreux. Un agoniste des récepteurs activés par les proliférateurs de peroxysomes (PPAR) gamma augmente l’expression de la protéine ACSL4 exprimée dans les lignées GBM. L’étude en composition d’acides gras cellulaires a révélé que les tissus de cerveau non cancéreux contenaient une importante quantité d’AGPI dont le DHA en comparaison avec des tissus cancéreux et lignées GBM qui contiennent plus d’acides gras mono insaturés. L’atténuation de l’ACSL4 par petit acide ribonucléique interférent (siARN) résulte en une diminution de l’incorporation en AA chez les lignées GBM. Cette diminution de l’incorporation n’affecte pas la prolifération cellulaire mais pourrait être associée à une augmentation de l’apoptose. L’absence de transcrits d’acs14 spécifiquement présente dans le tissu cérébral non cancéreux de patients pourrait être liée à l’apparition ou au caractère agressif de cancer cérébral primaire. Enfin, l’étude d’enzymes, telles que l’ACSL4, impliquées dans le métabolisme lipidique sont souvent des protéines membranaires qui sont souvent difficilement détectables par immunobuvardage. Afin de s’assurer d’une détection adéquate de l’ACSL4 lors de cette étude, j’ai aussi évalué la méthode classique de préparation d’échantillons pour des analyses d’immunobuvardage de type western. Je démontre que l’étape de chauffage d’échantillons dans le tampon classique Laemmli devrait être évité pour l’analyse de plusieurs protéines transmembranaires dont l’ACSL4 puisque que ceci provoque une agrégation protéique associée avec une perte de la quantité de protéine qui migre correctement sur des gels de polyacrylamide et donc une perte du signal de la protéine d’intérêt. Ces observations, qui sont présentés en premier dans cette thèse, permettront aux chercheurs de modifier leurs protocoles afin de mieux étudier ces protéines à caractère hydrophobe.

Name thesis:degree_name

Maîtrise ès sciences (biochimie)

Level thesis:degree_level

2e cycle

Discipline thesis:degree_discipline

Faculté des sciences

Grantor dc:publisher

Université de Moncton

Year dc:date.issued

2021

Author dc:creator

• Biam, Roody Simon Sarko

Advisor dc:contributor.advisor

• Surette, Marc, (Marc Edgar)

• Cerveau
• Cancer
• Tumeurs
• Acides gras insaturés

Statement dc:rights

• Author

Language dc:language.iso

iso639-2b, fre

Dc Identifier Other

umir:2264

OAI identifier oai:identifier

oai:umoncton.scholaris.ca:20.500.14658/7236