Expresión y purificación del factor acelerador del decaimiento de la convertasa recombinante de Trypanosoma cruzi

Trypanosoma cruzi, protozoo perteneciente a la familia Trypanosomatidae, es el agente causal de la enfermedad de Chagas. El principal mecanismo de transmisión de esta enfermedad es vectorial, por medio de insectos hemípteros hematófagos de la familia Reduviidae. Los tripomastigotes, formas infectantes del parásito, son capaces de resistir la acción del Sistema del Complemento (C) del hospedero, importante componente efector de la respuesta inmune innata. Se describen 3 vías de activación: clásica (VC), alterna (VA) y de las lectinas (VL), las cuales se activan en forma de cascada, por lo cual el C debe ser finamente regulado, impidiendo el daño en células del hospedero. En mamíferos, una proteínas reguladoras del C es el factor acelerador del decaimiento de la convertasa (DAF). DAF actúa inactivando las proteínas C3 y C5 convertasas de la VC y VA, acelerando su decaimiento. Se ha reportado que T. cruzi expresa factores reguladores del C similares a los del hospedero mamífero, inhibiendo su activación. Entre estos, se ha identificado la expresión de una proteína con función similar a DAF humana (T-DAF), de la cual sólo se han expresado parcialmente algunos fragmentos y se desconoce gran parte de sus funciones. En esta memoria de título se amplificó e insertó la secuencia nucleotídica codificante para la proteína de T. cruzi T-DAF en un vector de expresión de Escherichia coli. Utilizando bacterias transformadas con el plasmidio generado, se expresó y purificó en condiciones nativas la proteína recombinante T-DAF y se caracterizó su estructura tridimensional mediante un modelamiento in silico.

Grantor dc:publisher

Universidad de Chile

Year dc:date.issued

2016

Author dc:creator

• Mendel Reyes, Yael Andrea

Advisor dc:contributor.advisor

• Ramírez Toloza, Galia

• Trypanosoma cruzi
• Proteínas del sistema complemento
• Factor D del complemento
• Convertasas de complemento C3-C5

Statement dc:rights

• Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile

Licence dc:rights.uri

• http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/

Language dc:language.iso

es

Repository record dc:identifier.uri

https://repositorio.uchile.cl/handle/2250/142324

OAI identifier oai:identifier

oai:repositorio.uchile.cl:2250/142324