Obtenção e regeneração de protoplastos de Crinipellis perniciosa, agente etiológico da vassoura-de-bruxa no cacaueiro (Theobroma cacao L.)

Este trabalho teve por objetivo definir os parâmetros para a obtenção e regeneração de protoplastos de Crinipellis perniciosa. O melhor estabilizador osmótico para a liberação de protoplastos foi KCl 0.8M em tampão fosfato 10 mM, pH 5.8, contendo 20 mg.mL -1 da enzima lítica Glucanex e 10 mg.mL -1 de BSA, após 1 a 2 horas de digestão enzimática do micélio. Os protoplastos foram liberados nestas condições, na ordem de 2,0 x 10 7 por mL de estabilizador osmótico, a partir de 300mg de micélio secundário de C. perniciosa crescido em meio BDA. A melhor freqüência de regeneração obtida foi de 2,0% quando sacarose 0,5M foi utilizada como estabilizador osmótico. A coloração de núcleos dos protoplastos revelou que 58,8% dos protoplastos eram anucleados, 37,5% uninucleados e 3,7% binucleados. Uma análise genética por RAPD de C. perniciosa e das colônias regeneradas a partir de protoplastos não revelou polimorfismos entre elas, embora diferenças, como crescimento lento e aspecto morfológico do micélio de algumas colônias tenham sido observadas. O micélio do isolado de C. perniciosa, bem como das colônias regeneradas a partir de protoplastos, são dicarióticas e apresentam grampos de conexão.

Grantor dc:publisher

Universidade Federal de Viçosa

Year dc:date.issued

2001

Author dc:creator

• Santos, Jildete Karla dos

Advisor dc:contributor.advisor

• Queiroz, Marisa Vieira de

Contributors dc:contributor

• Araújo, Elza Fernandes de
• Moraes, Célia Alencar de

• Vassoura-de-bruxa
• Crinipellis perniciosa
• Cacaueiro

Statement dc:rights

• Acesso Aberto

Language dc:language.iso

por

Repository record dc:identifier.uri

http://www.locus.ufv.br/handle/123456789/10634

OAI identifier oai:identifier

oai:locus.ufv.br:123456789/10634